Streptavidiinipinnan biotiininsitoutumiskapasiteetin tutkiminen
Sirkiä, Saara (2015)
Sirkiä, Saara
Turun ammattikorkeakoulu
2015
All rights reserved
Julkaisun pysyvä osoite on
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2015121420504
https://urn.fi/URN:NBN:fi:amk-2015121420504
Tiivistelmä
Opinnäytetyön tavoitteena oli tutkia irtokaivoon pinnoitetun streptavidiinikerroksen biotiinin sitoutumiskapasiteettia osana DHR Finland Innotrac Diagnostics Oy:n tuotantoprosessia. Sitoutumisreaktio vaikuttaa yrityksen lopputuotteen, immunodiagnostisen testin, suorituskykyyn ja laatuun. Opinnäytetyö aloittaa yrityksessä avatun ongelmanselvityksen, joka pyrkii sulkemaan pois tuotteen tasaiseen laatuun ja suorityskykyyn vaikuttavia kriittisiä tekijöitä.
Opinnäytetyöhön valittiin kaksi tutkittavaa kriittistä tekijää: streptavidiiniliuoksen inkubointiaika sekä streptavidiinilla pinnoitettujen irtokaivojen kuivaus. Molemmista tekijöistä valittiin testattavaksi kaksi äärimmäistä ilmiötä. Näiden erien streptavidiinikaivot valmistettiin kahdella analyytillä lopputuotteeksi, ja kaseteilla suoritettiin in-house -kontrolliliuoksien lineaarisuusajo AQT 90 Flex – immunoanalysaattorilla.
Alhaisella sitoutumiskapasiteetilla ei todettu olevan vaikutusta lopputuotteen suorituskykyyn. Huolimatta suuresta tuloserosta sitoutumiskapasiteettitestissä molemmat streptavidiinierät antoivat samantasoisia tuloksia lineaarisuusajoissa. Työssä suoritettujen kokeiden perusteella voidaan sitoutumiskapasiteetin hyväksyntärajan laskemista harkita.
Opinnäytetyöhön valittiin kaksi tutkittavaa kriittistä tekijää: streptavidiiniliuoksen inkubointiaika sekä streptavidiinilla pinnoitettujen irtokaivojen kuivaus. Molemmista tekijöistä valittiin testattavaksi kaksi äärimmäistä ilmiötä. Näiden erien streptavidiinikaivot valmistettiin kahdella analyytillä lopputuotteeksi, ja kaseteilla suoritettiin in-house -kontrolliliuoksien lineaarisuusajo AQT 90 Flex – immunoanalysaattorilla.
Alhaisella sitoutumiskapasiteetilla ei todettu olevan vaikutusta lopputuotteen suorituskykyyn. Huolimatta suuresta tuloserosta sitoutumiskapasiteettitestissä molemmat streptavidiinierät antoivat samantasoisia tuloksia lineaarisuusajoissa. Työssä suoritettujen kokeiden perusteella voidaan sitoutumiskapasiteetin hyväksyntärajan laskemista harkita.